第十節(jié) 燒傷濕性醫(yī)療技術(shù)MEBO的抗菌作用實驗研究(續(xù))
作者:中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會燒傷專業(yè)委員會 出版社:中國醫(yī)藥科技出版社 發(fā)行日期:2000年6月[摘要] 目的:觀察MEBO(含100%MEBO,以下簡稱MEBO)對燒傷常見細(xì)菌變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌的作用。方法:將上述細(xì)菌接種在普通瓊脂培養(yǎng)基上,并在接種的細(xì)菌表面涂上一層MEBO,置37℃,20h~22h觀察。結(jié)果:MEBO使上述細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變異。與在含25%MEBO和含50%MEBO的培養(yǎng)基上細(xì)菌形態(tài)變異現(xiàn)象相比較,無論細(xì)菌形態(tài)變異出現(xiàn)的時間和形態(tài)變異的特點都有明顯差別。結(jié)論:MEBO具有較強的抗菌作用。
[關(guān)鍵詞] MEBO 細(xì)菌 形態(tài)變異 血漿凝固酶
已有實驗報道觀察了變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌在含有25 %MEBO和50%MEBO培養(yǎng)基上形態(tài)結(jié)構(gòu)等特性的變異現(xiàn)象。本實驗是模擬臨床燒傷病人創(chuàng)面涂抹一定厚度MEBO的用藥方法而設(shè)計的。實驗觀察了MEBO使上述細(xì)菌發(fā)生形態(tài)變異的現(xiàn)象,比在含25%MEBO和含50%MEBO培養(yǎng)基上的形態(tài)變異現(xiàn)象出現(xiàn)得早,形態(tài)變異特點也有差別,進(jìn)一步驗證了MEBO的抗菌作用。
材 料 和 方 法
1. 材料
MEBO: 北京光明中醫(yī)燒傷創(chuàng)瘍研究所研制。菌種:大腸桿菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌(由本室提供)、綠膿桿菌(由濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院院檢驗科提供)。營養(yǎng)瓊脂:北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠。
2. 實驗方法
制備普通瓊脂培養(yǎng)基。將上述4種細(xì)菌分別密集劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基上。接種細(xì)菌的面積約5cm×3cm。再將擠出的MEBO放于培養(yǎng)基中未接種細(xì)菌的部位,分別用無菌的取菌環(huán)取MEBO以密集劃線法涂布于已接種細(xì)菌的表面。然后,將培養(yǎng)基置37℃培養(yǎng)箱。20~22h為一代進(jìn)行傳代,傳10~15代。每代細(xì)菌都在涂抹MEBO的細(xì)菌處2~3個不同部位取菌涂片、染色,觀察形態(tài)變化。做金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗,觀察綠膿桿菌色素變化。
3. 檢測指標(biāo)
(1) 觀察MEBO對變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。
(2) 對上述4種細(xì)菌在MEBO和在含25%MEBO、50%MEBO培養(yǎng)基上細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、變異特點進(jìn)行比較。
結(jié) 果
1. MEBO對4種細(xì)菌形態(tài)變異的影響
(1) MEBO對變形桿菌形態(tài)變異的影響(見表5-10-1)
37℃,20~22h培養(yǎng)后進(jìn)行觀察比較。實驗結(jié)果表明MEBO對上述4種細(xì)菌在導(dǎo)致形態(tài)變異,使綠膿桿菌色素消失,和使金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產(chǎn)生能力減弱等方面都比25%MEBO和50%MEBO的作用顯著,而且出現(xiàn)早,形態(tài)變異的特點也有差異。實驗結(jié)果與以前報道的不同濃度的MEBO的抗菌作用是一致的。MEBO的藥效是與MEBT配合時產(chǎn)生的。
從表5-10-1~4中還可以看出,將每種細(xì)菌具有共同形態(tài)變異特點的歸為一組,這是較粗的分組,因為細(xì)菌在MEBO的作用下,傳代的代數(shù)不同,以及同一代的細(xì)菌接觸MEBO的量的多少不同,在形態(tài)變異方面是有差別的。上述細(xì)菌發(fā)生形態(tài)結(jié)構(gòu)的變異現(xiàn)象,說明了細(xì)菌的代謝和生理等特性的改變與它所處的環(huán)境有密切關(guān)系。
多種細(xì)菌均能在沒有基因改變的情況下發(fā)生形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面的變異。這種非遺傳性變異到目前為止除對誘導(dǎo)酶所引起的變異了解得比較深入外,其他變異現(xiàn)象的發(fā)生機制尚不十分清楚。但有充分證據(jù)說明分裂是受復(fù)制的控制。從上面現(xiàn)象也說明,細(xì)胞分裂對MEBO藥物非致死因子作用的敏感性,比蛋白質(zhì)、DNA、RNA合成和膜的形成更敏感,導(dǎo)致形成長桿菌和多核絲狀細(xì)胞。這種非遺傳性變異在適宜條件下經(jīng)過一段時間可以恢復(fù)。但上述桿菌在MEBO的作用下連續(xù)傳代,最后形成比原代菌小的桿菌或近似圓球形的細(xì)菌,多數(shù)細(xì)菌菌體可見著色深的顆粒。說明細(xì)菌在MEBO環(huán)境中最終導(dǎo)致了細(xì)菌的代謝合成速度減慢,影響了細(xì)菌生長繁殖速度。又如金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產(chǎn)生明顯減弱,這些都能影響細(xì)菌的毒性作用。
實驗結(jié)果進(jìn)一步說明了MEBO比含25%MEBO和含50%MEBO的抗菌作用都強。至于上述細(xì)菌變異現(xiàn)象的產(chǎn)生機制尚須深入探討研究。
(曲云英等)